Иммунохимия что это такое
Порядок сдачи иммунохимического анализа
Расписание приема анализов и выдачи результатов
Прием анализов и посылок:
Выдача результатов:
Готовность анализа — 10 рабочих дней.
Тел. единой справочной службы: +7 (800) 775-05-82, +7 (495) 612-45-51.
E-mail лаборатории: gammopat@blood.ru
Требования к сбору образцов для иммунохимического анализа
Кровь берется натощак в объеме 8 мл в пробирку для получения сыворотки (пробирка с активаторами свертывания крови, не ЭДТА, не гепарин). Не следует принимать пищу примерно за 6—10 часов до исследования, пить воду можно.
Мочу необходимо собирать в течение 24 часов на обычном питьевом режиме. При этом банку с мочой хранить в прохладном месте. Утром в 6—8 часов освободить мочевой пузырь (эту порцию мочи выливают). Затем в течение суток собирать всю мочу в чистый сосуд емкостью не менее 2 литров. Последняя порция берется точно в то же время, когда накануне был начат сбор (в 6—8 часов). Количество суточной мочи измерить мерным стаканом, отлить 10—50 мл в чистый пластиковый контейнер и доставить в лабораторию НМИЦ гематологии. Обязательно указать объем суточной мочи.
При пересылке образцов по почте или курьером необходимо знать, что на иммунохимический анализ высылается сыворотка крови в объеме 2—4 мл (цельная кровь пересылке не подлежит!) и моча в объеме 10 мл (из суточного объема с указанием суточного количества мочи). Все образцы должны быть подписаны и доставлены в пластиковом флаконе или пробирке с надежно закрывающейся крышкой. При опрокидывании флакона крышка должна держаться на своем месте и жидкость не должна выливаться через щели между крышкой и горлышком емкости. Время от взятия крови до доставки в лабораторию НМИЦ гематологии не должно превышать 2 суток, пересылка при этом осуществляется при температуре +4°…+10°С в специальных термоконтейнерах.
Необходимые документы для проведения исследования
Для сдачи анализов необходимо направление от врача.
Анализы на возмездной (коммерческой) основе принимаются только с направлением, содержащим следующие сведения:
При оплате безналичным способом медицинских услуг и отправке в НМИЦ гематологии биоматериала для лабораторных исследований кроме этого направления необходимо прикладывать следующие сопровождающие документы:
При отсутствии этих документов анализы не могут быть сделаны.
Иммунохимия что это такое
Прямыми показаниями к иммунохимическому исследованию принято считать клинические и лабораторные признаки, которые могут быть проявлением как непосредственно В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний (в первую очередь парапротеинемических гемобластозов), так и связанной с ними белковой патологии.
Один из самых частых лабораторных признаков, заставляющих предположить наличие парапротеинемии, — повышение СОЭ (особенно не связанное с реактивными состояниями и другими очевидными причинами), которое в данном случае является результатом увеличения глобулиновой фракции сыворотки крови за счет моноклонального иммуноглобулина. Следует отметить, что белок Бенс-Джонса, который является микроглобулином, не отражается на уровне СОЭ, что в части случаев вызывает диагностические затруднения и неоправданный отказ от исследований для выявления моноклональной секреции.
Другой широко известный симптом парапротеинемии — повышение уровня общего белка сыворотки крови за счет фракции глобулинов. Необходимо помнить, что это не абсолютный признак и связан он с далеко зашедшим заболеванием, когда масса опухоли значительна. Выраженные поликлональные гипергаммаглобулинемии характеризуются такой же биохимической картиной.
Еще одно проявление парапротеинемии — синдром гипервязкости. Его развитие обусловлено не только общим содержанием М-компонента, но и качеством моноклонального иммуноглобулина: высокомолекулярные парапротеины (IgM, полимерный IgA), а также белки, склонные к образованию крупных циркулирующих агрегатов (например, моноклональный IgG3), наиболее часто приводят к появлению гипервязкости. Описаны единичные случаи развития синдрома гипервязкости при миеломе Бенс-Джонса к-типа. В этих случаях моноклональные L-цепи проявляли необычную способность к агрегации, образуя комплексы с молекулярной массой до нескольких миллионов дальтон.
Такие состояния, как упорная протеинурия, особенно в отсутствие клеточного осадка, острая или хроническая почечная недостаточность, могут быть первыми симптомами секреции белка Бенс-Джонса. При этом отсутствуют такие привычные признаки миеломной болезни, как повышение СОЭ и гиперпротеинемия, а протеинурия может быть минимальной и ошибочно оценивается как проявление пиелонефрита. В таких случаях диагностика очень сложна, тем более что пациенты этой группы, как правило, попадают под наблюдение гематолога поздно, а в основном находятся на лечении в нефрологических отделениях.
При клинических проявлениях холодовой гемагглютинации пациент должен быть обследован на наличие моноклонального макроглобулина, практически всегда к-типа, проявляющего антительную активность по отношению к I-антигену мембраны эритроцитов. Оптимум активности этих антител приходится на температуру ниже температуры тела, чем и объясняются особенности клинической картины этого заболевания. Синтез моноклональных Холодовых агглютининов может быть связан с лимфопролиферативным процессом. В таких случаях секреция, как правило, очень незначительна и при рутинном исследовании в биохимической лаборатории обычно не выявляется.
Наличие клинических и лабораторных признаков криоглобулинемии должно насторожить в отношении моноклональной секреции, поскольку почти в половине случаев криоглобулинемия зависит от присутствия парапротеина в сыворотке крови. Тяжесть клинической симптоматики обусловливается не столько концентрацией криоглобулина, сколько температурой осаждения. В то же время установлено, что при повышении концентрации криоглобулинов температура криопреципитации может повышаться, приближаясь к температуре тела.
Электрофоретическое разделение плазмы здорового взрослого в геле агарозы.
1 — преальбумин; 2 — антихимотрипсин; 3 — церулоплазмин; 4 — фибронектин; 5 — С4 (4-й компонент комплемента); 6 — старт; 7 — С-реактивный белок; 8 — лизоцим; Альб. — альбумин; a1-Лп — а1-липопротеин; а1-Ат — а1,-антитрипсин; Ор— орозомукоид; a2-М — а2-макроглобулин; Гг2„, — гаптоглобин 2—2; р-Лп — р-липопротеин; Тф — трансферрин; Гп — гемо-пексин; C3 — 3-й компонент комплемента; Фб — фибриноген. Анод слева.
Криоглобулинемия I типа выявляется главным образом при миеломной болезни или макроглобулинемии Вальденстрема. Симптоматика связана с отложением криопреципитата в основном в сосудах кожи, что приводит к развитию геморрагического или язвенно-геморрагического васкулита, синдрома Рейно. Криоглобулинемия II типа, при которой парапротеин обладает активностью ревматоидного фактора, ассоциируется с лимфомами, хроническим лимфолейкозом, макроглобулинемией Вальденстрема, миеломной болезнью. Кроме того, она может быть связана с инфицированием вирусом гепатита С или В. Среди клинических проявлений отмечаются характерные признаки иммунокомплексной патологии: васкулит, артрит, гломерулонефрит.
В ряде случаев первым и некоторое время единственным проявлением заболевания, сопровождающегося моноклональной секрецией, может быть развитие AL-амилоидоза с характерной для него клинической картиной. В состав амилоида данного вида входят моноклональные L-цепи или их вариабельные районы (VL), причем преобладают Х-цепи, которые встречаются приблизительно в 2 раза чаще, чем к-цепи. Именно в составе амилоида была идентифицирована новая подгруппа Х-цепей (XVI), которая особенно часто является причиной развития AL-амилоидоза.
При исследовании аминокислотного состава амилоида и белков-предшественников обнаружено замещение части гидрофильных аминокислотных остатков в консервативной области вариабельных доменов на гидрофобные, что сказывается на ухудшении растворимости белка и склонности к образованию агрегатов. Присущая таким белкам «амилоидогенность» была продемонстрирована в опытах in vivo: при введении мышам очищенных белков Бенс-Джонса, полученных от больных с амилоидозом, развивался типичный амилоидоз, причем в состав амилоида входили введенные моноклональные L-цепи.
Типичным показанием к проведению иммунохимического исследования являются остеодеструкции плоских костей, особенно единичные и труднодоступные для биопсии.
Неясные по происхождению плазмоцитозы костного мозга, особенно при умеренном повышении содержания плазматических клеток, также нуждаются в иммунохимической характеристике при проведении дифференциальной диагностики.
Подозрение на наличие М-градиента при рутинном лабораторном исследовании (ЭФ в биохимической лаборатории) должно служить поводом для развернутого иммунохимического исследования, учитывая рассмотренные ранее случаи возникновения ложных М-градиентов.
Частые инфекции легких, верхних дыхательных путей, мочеполовой системы (иногда в дебюте заболеваний, связанных с В-клеточной пролиферацией) следует расценивать как проявление вторичной гипогаммаглобулинемии. Ее генез сложен и связан как со снижением количества нормальных В-клеток, так и с нарушением межклеточных взаимодействий, регулирующих синтез иммуноглобулинов. При рецидивирующих, плохо поддающихся лечению инфекционных осложнениях пациент нуждается как минимум в оценке уровня сывороточных иммуноглобулинов.
Кроме того, перед назначением заместительной терапии препаратами у-глобулинов, особенно вводимыми внутривенно, при любых заболеваниях необходимо исследование сывороточных иммуноглобулинов для исключения первичного селективного IgA-дефицита. Этот самый распространенный из первичных гуморальных иммунодефицитов (частота в популяции достигает 1:700) в ряде случаев протекает бессимптомно. Повторное введение таким больным препарата у-глобулина, содержащего чужеродный для них белок IgA, приводит к развитию выраженных реакций.
Иммунохимические исследования периодически проводят в ходе лечения больных парапротеинемическими гемобластозами и с другими секретирующими В-клеточными опухолями для оценки эффективности лечения, а также пациентам с моноклональными гаммапатиями неясного генеза (МГНЗ).
Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021
Иммунохимия что это такое
Определение экспрессии различных белков на поверхности клеток, основанное на высокоспецифической реакции антиген – антитело.
ИЦХ-анализ, иммуноцитохимия с антителами, иммуноцитохимическая оценка экспрессии белков, иммуноцитохимический тест.
Immunocytochemical (ICC) study, ICC tests, Immunocytochemical examination, Immunocytochemistry with antibody, Immunocytochemical study of antigen expressions.
Жидкостная цитология с последующим иммуноцитохимическим исследованием (ИЦХ).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Аспират из полости матки.
Общая информация об исследовании
ИЦХ исследование – это метод молекулярной иммунологической диагностики, используемый для оценки наличия специфического белка или антигена в клетках с использованием специфического антитела, которое связывается с ним, что позволяет визуализировать и анализировать под микроскопом. Данный метод позволяет проводить иммунологический анализ цитологического материала в условиях сохранения морфологии клеток. Результаты оцениваются качественно и количественно.
ИЦХ позволяет оценить, действительно ли клетки в конкретном образце экспрессируют данный антиген. В тех случаях, когда обнаружен иммуноположительный сигнал, становится возможным определять, где именно расположен антиген, степень его экспрессии.
Таким образом, иммуноцитохимическое исследование существенно расширяет возможности цитологической диагностики. Появляется возможность визуализации различных вне- и внутриклеточных маркеров, которые не определяются при обычном исследовании.
Существует много способов подготовки образцов клеток для иммуноцитохимического анализа. Каждый метод имеет свои сильные и уникальные характеристики, поэтому правильный метод может быть выбран для желаемого образца и результата.
Иммуноцитохимия на основе моноклональных антител является одним из наиболее ценных инструментов, доступных в клеточной биологии и патологии.
ИЦХ-анализ может проводиться как с моноклональными антителами, так и с поликлональнами. Важным, основным принципом является то, что с методологической точки зрения нет существенных различий между иммуноцитохимией на основе моноклональных и поликлональных антител. Специфичность первичного антитела является наиболее важной предпосылкой для надежной иммуноцитохимии.
Известно более 200 антител, используемых в качестве диагностических, прогностических и прогнозирующих биомаркеров. Вот несколько примеров:
Так, при раке молочной железы иммуноцитохимическое исследование позволяет определить гормональный фон, на котором возник опухолевый процесс, способность клеток к быстрому делению, чувствительность к химиопрепаратам и лучевой терапии. На основании цитологического заключения формируется вся дальнейшая тактика лечения, появляется возможность сделать терапию максимально эффективной при минимальных потерях. Использование метода позволяет выявить факторы, определяющие ответ опухоли на лечение. Исследование рецепторов эстрогенов и прогестерона, фактора пролиферативной активности Ki-67, онкопротеина C-erbB-2, белка р5, EGFR при раке молочной железы позволяет проводить эффективную целенаправленную таргетную терапию.
ИЦХ-анализ позволяет обнаружить даже единичные раковые клетки в лимфоузлах, костном мозге, биологических жидкостях, уточнить на догоспитальном этапе патогенез, определить прогноз заболевания, степень распространения опухолевого процесса и тактику лечения. 24% ИЦХ исследований проводится на пунктатах лимфатических узлов. ИЦХ исследования повышают достоверность определения гистогенеза новообразований в метастатически пораженных лимфатических узлах с 67 до 97 %.
Иммуноцитохимический анализ плевральных и перитонеальных выпотов в сложных диагностических случаях повышает результативность цитологического метода: чувствительность с 62 до 93 % и специфичность с 95 до 99 %.
При невыявленном первичном опухолевом очаге сочетание цитологического и ИЦХ исследований с использованием широкой панели моноклональных антител в 93% устанавливает локализацию опухоли.
При злокачественных недифференцированных новообразованиях иммуноцитохимические исследования позволяют диагностировать рак, меланому и лимфому с точностью до 90,3 %, 100 % и 87,5 % соответственно.
Также данное исследование позволяет избежать гипердиагностики опухолевого процесса при заподозренной патологии в результате рутинного цитологического исследования.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Экспрессия определенных белков и ее интенсивность позволяют идентифицировать патологическое состояние, спрогнозировать риск развития онкологического заболевания, определить источник метастазов. Также результаты исследования помогают выбрать правильную тактику ведения пациента.
Результат исследования интерпретируется врачом с учетом всех значимых клинических, дополнительных лабораторных и инструментальных данных.
Кто назначает исследование?
Гинеколог, уролог, эндокринолог, онколог, цитолог.
Иммунохимический анализ кала на скрытую кровь, как правильно подготовиться к нему
Диагностика кишечных и желудочных заболеваний является частой процедурой для многих пациентов, иммунохимический анализ кала на скрытую кровь — наиболее безболезненный вариант обследования органов желудочно-кишечного тракта.
1. Что представляет собой иммунохимический анализ кала на скрытую кровь
Иммунохимический анализ кала на скрытую кровь — метод лабораторного исследования, с помощью которого определяется наличие кровяных выделений в испражнениях человека, свидетельствующих о внутренних кровотечениях органов пищеварения.
Данное обследование назначается лечащим врачом при наличии у пациента тревожных симптомов:
Основная цель проведения анализа кала на скрытую кровь — выявление внутренних деформаций и изменений стенок желудка и кишечника. Исследование выполняют от трех до семи дней, в зависимости от возможности и загруженности конкретной медлаборатории.
Нарушения, происходящие в желудочно-кишечном тракте, долгое время не имеют ярко выраженной симптоматики, а малые вкрапления крови в испражнениях трудно заметить невооруженным взглядом. Исследование кала на скрытую кровь позволяет во время диагностировать заболевание и начать соответствующее лечение.
Процедура забора материала для анализа абсолютно безболезненна для пациента, в отличии от других методов диагностики желудочных недугов. Для того, чтобы анализ был максимально правдивым и информативным, требуется соблюдение определенного регламента предподготовки забора кала на скрытую кровь.
2. Как правильно подготовиться к иммунохимическому анализу кала на скрытую кровь
Дабы исключить ложноположительные или ложноотрицательные результаты исследования, необходимо четко выполнять предписания по подготовке к анализу.
Пациенту, за неделю перед забором материала, необходимо придерживаться строгой диеты. Исключить из рациона все гемоглобиносодержащие и красные продукты: мясо, рыбу, яблоки, свеклу, томаты, шпинат, паприку, субпродукты. Отказаться от употребления красящих напитков и любых медикаментов.
Запрещен прием любых слабительных средств, в том числе народных методов, ректальных свечей. За неделю до сдачи анализа кала на скрытую кровь минимизировать возможность механического травмирования прямой кишки и кишечника, отказаться от любых медицинских манипуляций, в том числе клизм и колоноскопии. За день до забора материала прекратить чистку зубов при помощи зубной щетки, дабы исключить вероятность травмирования и возникновения кровотечения десен. Девушкам запрещено выполнять сбор кала в период менструации и три дня после нее.
Помимо предварительной подготовки нужно ответственно подойти к процедуре забора образцов для исследования. Поэтому желательно приобрести особый стерильную тару для кала в аптеке. Образцы для диагностики не должны включать инородных примесей таких как вода, моча, выделения из половых органов. Дабы исключить возможность попадания посторонних жидкостей желательно предварительно подстелить в унитаз клеенку либо выполнять процедуру опорожнения кишечника в тщательно продезинфицированный сосуд.
Входящей в комплект для сбора кала ложкой взять три фрагмента материала из различных участков испражнения. Количество образцов для тестирования на наличие скрытой крови не может быть меньше чайной ложки. Забор анализа необходимо доставить в медлабораторию на протяжении трех часов, нельзя предварительно замораживать и размораживать образцы.
3. Что означает наличие скрытой крови в каловых массах
Небольшое количество крови в кале — нормальное явление, характерное для процессов жизнедеятельности человеческого организма. Стандартный уровень кровяных выделений не более 2 мг на 1 г кала, превышение этого показателя означает, что в испражнениях присутствует скрытая кровь, источник возникновения которой необходимо дополнительно определить.
Положительный анализ кала на скрытую кровь свидетельствует о наличии таких заболеваний:
Последующий анализ и расшифровку результатов следует доверить только лечащему врачу, который на основании дополнительных методов обследования желудочно-кишечного тракта сможет поставить верный диагноз и назначить грамотное лечение.
Иммунная система Часть 8 Анализы
Иммунная система Часть 8 Анализы
Помимо поражения вирусом иммунодефицита человека, вторичный иммунодефицит развивается после объемных оперативных вмешательств, обширных, тяжелых инфекций, на фоне терапии иммуноподавляющими или сильными противовоспалительными препаратами.
Исследования иммунитета помогают в оценке активности и стадии воспалительного, инфекционного и аллергического иммунного ответов, эффективности проводимой терапии. С этой целью они проводятся неоднократно.
Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой
Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой позволяет выявить множество заболеваний. Он отражает состояние гемопоэза – созревания и роста клеток крови в костном мозге. О состоянии иммунной системы говорят уровни белых клеток крови – лейкоцитов и лейкоцитарная формула. Наблюдение за лейкоцитарной формулой в динамике заболевания позволит выявить осложнения, распространение инфекции по организму, реакцию на лечение.
При бактериальных инфекциях можно увидеть повышение лейкоцитов и нейтрофилов с появлением их молодых форм в крови.
При вирусных инфекциях, наоборот, лейкоциты снижаются, а в лейкоцитарной формуле преобладают лимфоциты.
Преобладание тех или иных популяций в лейкоцитарной формуле помогает в диагностике причины воспаления. Например, при определенных инфекциях (например, инфекционный мононуклеоз) нарастают измененные моноциты, а при аллергических и паразитарных заболеваниях – эозинофилы.
Наличие совсем юных клеток (бластов) в крови признак чрезмерной активации костного мозга, а низкий уровень лейкоцитов и нейтрофилов без воспаления – его угнетения.
Лимфоциты, иммунофенотипирование
Выделяют разные популяции лимфоцитов, которые играют ключевую роль в направлении иммунного ответа – клеточный или гуморальный. Определение иммунного фенотипа лимфоцита возможно в специальном исследовании методом проточной цитофлюориметрии. Фенотип лимфоцитов зависит от особых рецепторов на их поверхности – кластеров дифференцировки CD. Наличие того или иного рецептора свидетельствует о принадлежности клетки к определенной популяции лимфоцитов.
Т-лимфоциты (CD3+) общие и их подтипы:
Т- клетки-киллеры (CD3+CD16+CD56+)
Естественные клетки-киллеры (CD3-CD16+CD56+)
Лимфоциты с маркером HLA-DR+
Иммунорегуляторный индекс (Т-хелперы/Т-цитотоксические)
Дополнительно исследуют другие CD маркеры лимфоцитов для определения их активности.
Циркулирующие иммунные комплексы и система комплемента
Антигены связываются специфическими антителами с образованием иммунных комплексов. Последние активируют комплемент, способствуют удалению чужеродных антигенов. Если их слишком много циркулирует в крови, они откладываются в тканях, например почек, кожи, легких. Высокое содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) наблюдается при аутоиммунных, хронических воспалительных и инфекционных заболеваниях. С другой стороны, определение ЦИК в крови неспецифично, не отражает ни причину их нарастания, ни непосредственное влияние на органы.
Снижение уровней ЦИК на фоне лечения говорит о затихании воспалительного процесса и эффективности терапии.
Наиболее распространенными анализами на систему комплемента являются определение ключевых С3 и С4 компонентов. Показаниями для исследования – повторяющие инфекции, ревматические и аутоиммунные заболевания для выявления врожденных дефицитов комплемента, утяжеляющих течение этих болезней.
Исследуют уровни ЦИК, С3-компонент и С4-компонент комплемента.
Иммуноглобулины A, M, G, E
Общие иммуноглобулины – показатели гуморального иммунного ответа. Уровни IgM возрастают в острый период заболевания и при обострении хронической инфекции, IgG – в процессе выздоровления, IgA – в острый период заболевания, сохраняясь дольше IgM, отражают затяжное течение и поражение слизистых оболочек. Повышенные уровни IgE свидетельствуют об аллергическом воспалении.
Общие иммуноглобулины не объясняют причину инфекции, поэтому целесообразно смотреть специфические антитела к конкретным возбудителям. Основные показания для определения общих антител – это подозрение на врожденный иммунодефицит, связанный с гуморальным иммунитетом.
Интерфероновый статус и Интерлейкины
Исследования Интерфероновый статус, Интерлейкин-1бета, Интерлейкин-6, Интерлейкин-8, Интерлейкин-10, Фактор некроза опухоли-альфа и другие определяют уровни цитокинов – специфических маркеров иммунного ответа. Помогают в определении стадии заболевания, врожденных дефектов, онкологических заболеваний, активности воспалительного процесса и осложнений. Как правило, требуют динамического контроля для помощи в оценке клинической ситуации и эффективности лечения.
Фагоцитарная активность
Фагоцитарной активностью обладают нейтрофилы, моноциты-макрофаги и другие клетки. Фагоцитоз – это способность поглощать и переваривать антигены, вплоть до целых клеток. Он определяет возможности врожденного иммунитета и необходим для формирования приобретенного иммунитета. Оценка фагоцитарной активности клеток крови трудоемка и сложна. Используют такие тесты как оценка фагоцитоза бактерий с флюоресцентной меткой, тест по восстановлению нитросинего тетразолия.
Фагоцитарная активность повышается при бактериальных, аутоиммунных, аллергических заболеваниях.
Ее снижение наблюдается при врожденных дефектах фагоцитарной системы, хронических инфекциях.
Иммунограмма – это общее название всех исследований иммунного статуса. И в разных лабораториях включают разное сочетание анализов в зависимости от цели обследования. Для оценки клеточного иммунитета применяют исследование иммунофенотипов лимфоцитов. Для оценки гуморального иммунитета – общие иммуноглобулины, при необходимости дополняя их ЦИК, комплементом и белками острой фазы. Для оценки врожденного иммунитета больше подходят определения цитокинов в крови, фагоцитарная активность.